转录因子UstR调控黄曲霉毒素的合成及其生物学功能研究

目的 明确黄曲霉中Zn(II)2Cys6转录因子稻曲菌素B调控蛋白R(ustiloxin B biosynthesis protein R,UstR)功能,解析UstR对黄曲霉生长、次级代谢和黄曲霉毒素(aflatoxin,AF)合成的调控.方法 本研究利用聚乙二醇介导的同源重组构建ustR基因缺失突变体;比较敲除突变体和野生型菌株在黄曲霉生长发育、胁迫响应、侵染能力、AF合成及次级代谢产物合成等方面的差异,并通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒测定AF合成底物变化,利用实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)验证AF合成相关基因的转录水平改变,明确转录因子UstR对AF合成的调控作用.结果 基因敲除突变体的分生孢子形成受抑制,孢子产量降低,但菌核形成能力显著提高;ustR缺失不影响黄曲霉细胞壁完整性、胁迫响应能力以及侵染能力;UstR能够影响黄曲霉多种次级代谢产物产量,其中UstR通过正调控AF合成基因簇表达影响AF生物合成.结论 UstR是黄曲霉重要的Zn(II)2Cys6转录因子,调控黄曲霉生长发育及AF产生,研究进一步完善了AF合成调控网络,为AF污染防控提供了新的防控潜在靶点.