赭曲霉毒素A时间分辨荧光侧流层析试纸条的研究

目的 构建一种基于时间分辨荧光纳米微球的赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)侧流层析试纸条.方法 基于免疫层析原理,以时间分辨荧光纳米微球为信号探针,降低非特异性荧光的干扰,提高检测灵敏度,并通过优化样品提取液和样品稀释液,进一步提高现场检测OTA的灵敏度和准确性.结果 OTA在1.0～50.0 μg/kg范围内,T线和C线荧光强度比值与OTA浓度的对数线性关系良好,相关系数r2为0.9981～0.9998.不同基质中OTA的检出限和定量限分别为0.401～0.614 μg/kg和0.973～1.617 μg/kg,加标回收率为89.53％～118.37％,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)小于12％(n=3),且与将呕吐毒素、伏马菌素B1、黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的交叉反应率均小于5％,特异性良好.OTA侧流层析试纸条基于荧光定量快速检测技术平台可在8 min内快速准确地定量测定出待测样本中OTA含量.结论 本研究所制备的时间分辨荧光侧流层析试纸条可实现玉米、小麦和饲料中OTA的快速定量检测,并具有成本低、灵敏度高、操作简便、准确高、重复性好、特异性好的优点,可满足国内外OTA检测的技术要求,为真菌毒素的快检技术的发展提供了技术支撑.