鸡蛋致敏原溶菌酶的B细胞IgG线性表位定位

目的 探究鸡蛋致敏原溶菌酶的B细胞线性表位.方法 先使用DNAStar、Immunomedicine Group、BepiPred、Bcepred和ABCpred对其氨基酸序列分析,预测其潜在的B细胞线性表位,同时合成覆盖其完整氨基酸序列的重叠肽,然后利用斑点杂交法筛选出与抗溶菌酶兔血清IgG特异性结合的多肽片段,从而定位出溶菌酶的B细胞IgG线性表位.结果 通过生物信息学工具综合分析预测出了鸡蛋溶菌酶的4个B细胞线性表位,分别为 AA18～21(DNYR)、AA39～51(NTQATNRNTDGST)、AA62～78(WWCNDGRTPGSRNLCNI)、AA109～117(VAWRNRCKG);利用dot-blot定位出5个鸡蛋溶菌酶的B细胞IgG线性表位,分别为AA1～15(KVFGRCELAAAMKRH)、AA28～30(WVC)、AA70～78(PGSRNLCNI)、AA103～117(NGMNAWVAWRNRCKG)、AA124～126(IRG).研究结果表明,采用生物信息学工具预测的B细胞线性表位与已知的溶菌酶的B细胞IgE线性表位的重合率达75％,与用dot-blot定位的B细胞IgG线性表位的重合率达40％,一定程度上证实了利用生物信息学预测致敏原表位的可行性,但预测结果的准确性仍需进一步验证.结论 本研究确定的溶菌酶B细胞线性表位可为进一步开展溶菌酶的精准检测和低致敏食品等研发工作提供关键的结构信息.