燕窝显微特征及基于DNA条形码的基源鉴别

目的 建立基于Cytb等5种基因序列的燕窝(edible bird's nest,EBN)基源DNA条形码鉴别方法.方法 以泰国、越南、马来西亚、印度尼西亚等地的20个正品燕窝和1个伪品燕窝为研究对象,利用显微技术对21个样品进行观察,再提取基因组DNA,分别利用5对引物扩增Cytb、ND2、12S、COI和Fib7基因序列并双向测序.聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)产物测序分析后,NCBI中进行BLAST搜索,分析样品遗传距离,利用最大似然法(maximum likelihood,ML)进行系统发育分析.结果 正品燕窝和伪品燕窝在形态上具有较明显区别.BLAST分析表明,所获得的Cytb、ND2、12S、COI基因序列均与雨燕科的爪哇金丝燕(Aerodramus fuciphagus)具有最高的序列一致性.系统发育分析表明不同种类的燕窝处于不同分支中,所测定的4个基因序列均与爪哇金丝燕处于同一分支中,显示最近的亲缘关系.结论 该方法可用于燕窝基源的分子鉴定,也为燕窝的真伪鉴别及溯源提供理论依据.