三重荧光PCR检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌O157:H7

三重荧光PCR检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌O157:H7

目的 建立一种检验沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌O157:H7的TaqMan探针三重荧光PCR方法.方法 针对沙门氏菌属特异性invA基因、金黄色葡萄球菌rpoB基因、大肠埃希氏菌O157:H7的rfbE基因设计引物与探针,建立三重荧光PCR体系,对引物与探针浓度及退火温度优化,并进行特异性和敏感性研究.结果 引物与探针的最优添加量为:invA 0.2μL、ropB 0.4μL、rfbE 0.5μL;最优退火温度为60℃.特异性试验显示16株非目标菌株扩增结果为阴性;目标菌株均出现显著扩增.敏感性试验显示,3种微生物对应的最低菌体数量检出量依次为:230、38、670 CFU.结论 该...

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Veröffentlicht in:食品安全质量检测学报 2021, Vol.12 (10), p.4179-4187
Hauptverfasser: 汪华, 左靖文, 杨学军, 汪胜
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的 建立一种检验沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌O157:H7的TaqMan探针三重荧光PCR方法.方法 针对沙门氏菌属特异性invA基因、金黄色葡萄球菌rpoB基因、大肠埃希氏菌O157:H7的rfbE基因设计引物与探针,建立三重荧光PCR体系,对引物与探针浓度及退火温度优化,并进行特异性和敏感性研究.结果 引物与探针的最优添加量为:invA 0.2μL、ropB 0.4μL、rfbE 0.5μL;最优退火温度为60℃.特异性试验显示16株非目标菌株扩增结果为阴性;目标菌株均出现显著扩增.敏感性试验显示,3种微生物对应的最低菌体数量检出量依次为:230、38、670 CFU.结论 该方法特异性好、灵敏度高,能够快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌O157:H7.
ISSN:2095-0381