姜黄素通过靶向PBK对结直肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用

目的研究姜黄素抑制结直肠癌HCT116细胞增殖的分子机制。方法 体外培养HCT116细胞，四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）检测不同浓度姜黄素（0、10、20、50、100、200μmol／L）对HCT116细胞增殖率的影响，实验分空白对照组、EGF组（单独加入20ng／mLEGF）、EGF＋姜黄素组；细胞锚定增殖实验检测药物对HCT116细胞增殖的抑制作用；体外结合及体外激酶实验检测姜黄素对磷酸化酶b激酶（PBK）活性的影响；Westernblotting及免疫组织化学方法检测姜黄素对PBK下游信号通路的影响。结果当姜黄素浓度〈50μmol／L时，对HCT116细胞影响较小；而当浓度达到100μmol／L时，HCT116细胞凋亡明显增加。HCT116细胞在软琼脂内锚定增殖的结果显示：与EGF组比较，EGF＋姜黄素组细胞克隆小且克隆数量少，具有药物浓度依赖性。体外结合及体外激酶实验结果显示姜黄素可以结合PBK，并抑制PBK的活性。Westernblotting及免疫组织化学结果显示姜黄素明显下调PBK下游信号通路ERK1／2及H3的磷酸化水平，具有时间和浓度依赖性。结论在结直肠癌HCT116细胞中，姜黄素可能通过抑制PBK的活性，起到抗HCT116细胞增殖的作用。