视网膜内质网应激免疫组织化学抗体浓度选择的实验研究

视网膜内质网应激免疫组织化学抗体浓度选择的实验研究

目的:探索小鼠视网膜色素变性(RP)模型视网膜内质网应激免疫组织化学(IHC)染色抗体的最适浓度,为研究RP发病机制及干预措施提供相应的指标检测方法.方法:给予清洁级健康雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射N-甲基-N-亚硝基脲(MNU,60mg/kg)制备RP小鼠模型,造模后第7d行视网膜电图(ERG)检测和苏木精-伊红(HE)染色验证造模成功,摘取眼球并采用IHC染色法检测视网膜内质网应激相关蛋白(IRE1、ATF6、PERK、GRP78、Caspase-12)表达情况.结果:IRE1、ATF6、PERK、GRP78、Caspase-12蛋白均在RP小鼠视网膜呈阳性表达,IRE1抗体浓度为1:...

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Veröffentlicht in:国际眼科杂志 2023, Vol.23 (1), p.32-38
Hauptverfasser: 陈小红, 梁婉娇, 黄诗舒, 孙晏, 罗欣, 赖璐, 池昭晟, 陈梅珠, 王云鹏, 严伟明
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的:探索小鼠视网膜色素变性(RP)模型视网膜内质网应激免疫组织化学(IHC)染色抗体的最适浓度,为研究RP发病机制及干预措施提供相应的指标检测方法.方法:给予清洁级健康雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射N-甲基-N-亚硝基脲(MNU,60mg/kg)制备RP小鼠模型,造模后第7d行视网膜电图(ERG)检测和苏木精-伊红(HE)染色验证造模成功,摘取眼球并采用IHC染色法检测视网膜内质网应激相关蛋白(IRE1、ATF6、PERK、GRP78、Caspase-12)表达情况.结果:IRE1、ATF6、PERK、GRP78、Caspase-12蛋白均在RP小鼠视网膜呈阳性表达,IRE1抗体浓度为1:1000、ATF6抗体浓度为1:500和1:1000(此抗体两种浓度阳性表达无差异,P>0.05)、PERK抗体浓度为1:1500、GRP78抗体浓度为1:200、Caspase-12抗体浓度为1:100时,阳性表达强度适宜,且与各自其余抗体浓度相应蛋白阳性表达均有差异(P
ISSN:1672-5123
DOI:10.3980/j.issn.1672-5123.2023.1.06