提取液成分及提取温度对羊肉香肠蛋白提取效果的影响

TS251.5+3; 在不同温度下,用含有不同浓度SDS、DTT、尿素的Tris-HCl或PBS缓冲体系提取羊肉香肠中蛋白质,比较提取液中不溶物质体积,利用SDS-PAGE分析提取液中蛋白的含量和种类,研究不同提取液成分和提取温度对羊肉香肠蛋白提取效果的影响,为SDS-PAGE法研究加热对肉蛋白的影响提供蛋白提取方法.结果表明,当SDS浓度为4％时,1 mmol·L-1DTT和1％DTT对肉蛋白提取效果影响不明显,但当SDS浓度为2％时,1 mmol·L-1DTT和1％DTT对肉蛋白提取效果影响非常明显,这说明SDS和DTT对肉蛋白提取效果有影响,并且两者对提取效果可能存在相互作用.尿素对肉蛋白提取效果影响明显,尿素浓度越高,提取效果越好.缓冲液体系对肉蛋白提取效果影响明显,Tris-HCl缓冲液提取羊肉蛋白的效果更好,但无法用BCA定量,不便于随后SDS-PAGE上样时蛋白定量的需要,因此选用PBS缓冲溶液.此外,提取时置于4℃冰箱中过夜对香肠蛋白提取效果有增强作用.本试验结果可为SDS-PAGE法研究加热对肉蛋白影响时蛋白提取方法提供一定依据.