重组人甲状旁腺素(1-34)诱导过表达EGFR的角质形成细胞中差异表达转录因子的筛选

重组人甲状旁腺素(1-34)诱导过表达EGFR的角质形成细胞中差异表达转录因子的筛选

目的 利用转录组测序技术,筛选重组人甲状旁腺素(1-34)[rhPTH(1-34)]影响角质形成细胞(KC)内表皮生长因子受体(EGFR)表达的差异转录因子,以探讨rhPTH(1-34)治疗银屑病的机制.方法 慢病毒转染培养的HaCaT细胞,使之过表达EGFR.rhPTH(1-34)组加入0.01μmol/L rhPTH(1-34),空白组加入等量DMEM溶液.抽提两组细胞RNA,用紫外吸收测定法和变性琼脂糖凝胶电泳法进行RNA产量和质量检测.合成cDNA,实时定量PCR扩增,对文库有效浓度进行准确定量.上机测序,对所得数据进行处理和分析.用DESeq2软件分析两组数据之间的差异,以|log2...

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Veröffentlicht in:皮肤性病诊疗学杂志 2023, Vol.30 (4), p.314-321
Hauptverfasser: 赵文琪, 邬思远, 范娟, 张玲玲, 卜晓琳
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的 利用转录组测序技术,筛选重组人甲状旁腺素(1-34)[rhPTH(1-34)]影响角质形成细胞(KC)内表皮生长因子受体(EGFR)表达的差异转录因子,以探讨rhPTH(1-34)治疗银屑病的机制.方法 慢病毒转染培养的HaCaT细胞,使之过表达EGFR.rhPTH(1-34)组加入0.01μmol/L rhPTH(1-34),空白组加入等量DMEM溶液.抽提两组细胞RNA,用紫外吸收测定法和变性琼脂糖凝胶电泳法进行RNA产量和质量检测.合成cDNA,实时定量PCR扩增,对文库有效浓度进行准确定量.上机测序,对所得数据进行处理和分析.用DESeq2软件分析两组数据之间的差异,以|log2 foldchange|≥1且P
ISSN:1674-8468
DOI:10.3969/j.issn.1674-8468.2023.04.003