MiR-483-3P下调RIOK3蛋白表达促进神经母细胞瘤的增殖和迁移

目的：探讨 microRNA —483—3P（miR—483—3P）对神经母细胞瘤细胞的增殖、侵袭及迁移能力的影响，预测并验证 miR—483—3P 的靶基因及其对靶基因的影响。方法miRNA 微阵列芯片结果发现 miR—483—3P 在神经母细胞瘤中表达上调，差异倍数显著，并居于差异表达 miRNA 的首位。利用阳离子脂质体 LipofectamineTM2000将化学合成的 miR—483—3P inhibitor、miR—483—3P inhibitor 的阴性对照序列分别瞬时转染入人神经母细胞瘤 SH—SY —5Y 细胞株中，RT—qPCR 技术检测各组中 miR—483—3P 的表达水平，CCK—8法检测各组癌细胞的增殖情况，Transwell 小室实验检测各组癌细胞的体外侵袭和迁移能力。利用生物信息学软件预测 miR—483—3P 的靶基因并用荧光素酶报告基因检测实验、West-ern blot 实验加以验证。结果与癌旁正常组织相比，miR —483—3P 在神经母细胞瘤中高表达（P ＜0.01）；与阴性对照组相比，癌细胞转染 miR —483—3P inhibitor 后，miR —483—3P 表达显著下调（P ＜0.01），细胞的增殖情况和体外迁移能力均降低（P ＜0.05）。生物信息学软件预测出 RIOK3是 miR—483—3P 的靶基因之一，当细胞转染了 miR—483—3P inhibitor 后荧光酶活性升高（P ＜0.01）。与阴性对照组相比，当细胞转染了 miR —483—3P inhibitor 后在蛋白质水平 RIOK3表达升高（P ＜0.01）。结论RIOK3是 miR—483—3P 的靶基因之一，miR—483—3P 能下调 RIOK3的表达并显著促进神经母细胞瘤细胞的增殖和体外迁移。