草地贪夜蛾三个SfruPBPs对本种及同域种劳氏粘虫性信息素及腺体组分的亲和力

Q966; [目的]测定草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda 3个信息素结合蛋白(pheromone binding protein,PBP)(SfruPBP)对草地贪夜蛾及同域近缘种劳氏粘虫Leucania loreyi性信息素及腺体组分的结合特性,探究草地贪夜蛾这3个SfruPBPs在两种昆虫不同性信息素组分识别中的作用.[方法]以pET-30a(+)为载体分别构建草地贪夜蛾3个SfruPBPs的原核表达质粒,导入大肠杆菌Escherichia coli并培养至OD600=0.6～0.8后,加入IPTG进行这3个SfruPBPs的诱导表达,采用Ni-NTA琼脂糖磁珠进行蛋白纯化;利用荧光竞争结合实验测定这3个SfruPBPs与草地贪夜蛾和劳氏粘虫的共14种性信息素和腺体组分的结合特性.[结果]原核表达获得SfruPBP1-3重组蛋白,进一步纯化后电泳检测得到单一且预期大小的目的蛋白.荧光竞争结合实验测定发现,在草地贪夜蛾和劳氏粘虫已报道的总计14种性信息素和腺体组分中,SfruPBP1对这两种害虫的性信息素主组分Z9-14∶Ac特异性强结合,Ki=0.80 μmol/L;SfruPBP2结合谱较广,除对性信息素次要组分Z7-12∶Ac及腺体组分12∶ Ac,E7-12∶Ac和Z10-14∶Ac强结合(Ki＜1.00 μmol/L)外,还对性信息素主组分 Z9-14∶Ac 及腺体组分 Z9-12∶Ac 和11-12∶ Ac 具中等结合能力(1.00 μmol/L＜Ki＜4.00 μmol/L);SfruPBP3仅对腺体组分Z9-12∶Ac具中等结合能力(Ki=1.36 μmol/L).在上述与SfruPBP具有强或中等结合能力的组分中,Z9-14∶ Ac,Z7-12∶Ac及12∶Ac也是劳氏粘虫的性信息素或腺体组分,但3个SfruPBPs对劳氏粘虫的特有腺体组分Z7-14∶ Ac均无明显结合能力.[结论]草地贪夜蛾3个SfruPBPs均在其性信息素感受中发挥作用,但不同SfruPBPs具有明显的组分选择性;这3个SfruPBPs对劳氏粘虫的腺体特有组分Z7-14∶ Ac均无明显结合能力.