miR-150下调Notch3抑制人脂肪干细胞成骨分化

目的:探讨miR-150调控Notch3对人脂肪干细胞(hADSCs)成骨分化的影响.方法:体外分离和培养hADSCs,将其分为空白对照组(NC组)、绿色荧光蛋白对照组(GFP组)和过表达miR-150组(miR-150组).实时荧光定量PCR法检测各组hADSCs miR-150的表达,免疫印迹检测hADSCs中成骨标志物RUNX-2、Notch3的表达.构建Notch3敲低的hADSCs组(Notch3-siR组)、GFP组和NC组,免疫印迹检测3组hADSCs Notch3的表达.利用成骨细胞诱导液定向诱导各组hADSCs向成骨细胞分化,免疫印迹检测各组hADSCs RUNX-2的表达....

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Veröffentlicht in:解剖学杂志 2020, Vol.43 (6), p.467-471
Hauptverfasser: 王俏, 柏树令, 李志远, 王小红, 田晓红, 常世杰, 佟浩, 范军
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的:探讨miR-150调控Notch3对人脂肪干细胞(hADSCs)成骨分化的影响.方法:体外分离和培养hADSCs,将其分为空白对照组(NC组)、绿色荧光蛋白对照组(GFP组)和过表达miR-150组(miR-150组).实时荧光定量PCR法检测各组hADSCs miR-150的表达,免疫印迹检测hADSCs中成骨标志物RUNX-2、Notch3的表达.构建Notch3敲低的hADSCs组(Notch3-siR组)、GFP组和NC组,免疫印迹检测3组hADSCs Notch3的表达.利用成骨细胞诱导液定向诱导各组hADSCs向成骨细胞分化,免疫印迹检测各组hADSCs RUNX-2的表达.结果:hADSCs成骨诱导14 d期间,miR-150表达逐渐下降.miR-150组的Notch3表达明显低于GFP组和NC组.经体外成骨诱导后,miR-150组RUNX-2蛋白表达水平低于GFP组和NC组.敲低Notch3后体外诱导hADSCs,Notch3-siR组RUNX-2蛋白的表达水平低于GFP组和NC组.结论:miR-150通过下调Notch3表达抑制hADSCs成骨分化.
ISSN:1001-1633
DOI:10.3969/j.issn.1001-1633.2020.06.001