小鼠生发泡完整卵母细胞一个特异基因的克隆及其在胚胎的表达

小鼠生发泡完整卵母细胞一个特异基因的克隆及其在胚胎的表达

目的:克隆和筛选小鼠生发泡完整卵母细胞(GV卵)特异基因,并检测其一在胚胎中的表达.方法:应用抑制性消减杂交技术(SSH),建立GV卵特异的cDNA文库.通过斑点杂交法进一步筛选并对阳性克隆进行序列测定和同源性分析;采用RT-PCR方法观察其一在着床前胚胎的表达.结果:克隆发现18个基因和8个EST序列在GV卵中特异表达.RT-PCR显示该阳性克隆的基因在GV卵、MII卵、1-细胞胚胎和2-细胞胚胎有表达,其短片段是预期要扩增者,从MII卵开始表达下降;长片段在GV卵、MII卵、1-细胞胚胎和2-细胞胚胎表达未见明显变化.长、短片段两端序列一致.结论:该基因是GV卵特异cDNA文库中的一个基因...

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Veröffentlicht in:解剖学杂志 2004, Vol.27 (3), p.239-243
Hauptverfasser: 王世鄂, 黄威权
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的:克隆和筛选小鼠生发泡完整卵母细胞(GV卵)特异基因,并检测其一在胚胎中的表达.方法:应用抑制性消减杂交技术(SSH),建立GV卵特异的cDNA文库.通过斑点杂交法进一步筛选并对阳性克隆进行序列测定和同源性分析;采用RT-PCR方法观察其一在着床前胚胎的表达.结果:克隆发现18个基因和8个EST序列在GV卵中特异表达.RT-PCR显示该阳性克隆的基因在GV卵、MII卵、1-细胞胚胎和2-细胞胚胎有表达,其短片段是预期要扩增者,从MII卵开始表达下降;长片段在GV卵、MII卵、1-细胞胚胎和2-细胞胚胎表达未见明显变化.长、短片段两端序列一致.结论:该基因是GV卵特异cDNA文库中的一个基因,且是母源性基因,提示该基因在卵母细胞成熟和合子基因激活中起一定作用.
ISSN:1001-1633
DOI:10.3969/j.issn.1001-1633.2004.03.007