小檗碱对肝癌细胞活性与增殖能力的影响及其机制

R773.4; 目的 探讨小檗碱(BBR)对肝癌细胞的活性与增殖能力的影响及其机制.方法 取正常人肝细胞MIHA和人肝癌细胞Hep3B、HepG2,设置对照组与0、12.5、25、50 μmol/L BBR组,采用CCK-8实验、克隆形成实验探究无糖环境下BBR对MIHA、Hep3B、HepG2细胞活性及克隆形成的影响;SYTOX 荧光染色检测细胞死亡情况;流式细胞术检测BBR孵育后肝癌细胞活性氧(ROS)水平的变化;Western blotting检测BBR孵育后Nrf2及其相关蛋白的变化;将蛋白酶体抑制剂MG132及蛋白合成抑制剂环己酰胺(CHX)与BBR共同孵育,研究其对Nrf2蛋白的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测BBR孵育后Hep3B细胞的Nrf2及HO-1在基因水平的变化;于裸鼠皮下注射Hep3B细胞,构建裸鼠成瘤模型,在BBR组及对照组裸鼠腹腔分别注射BBR或等量生理盐水,观察BBR在体内对肿瘤生长的影响.HE及免疫组化染色研究在体内环境BBR对Nrf2及相关蛋白的影响.结果 无糖环境下BBR孵育后,肝癌细胞Hep3B、HepG2的活性逐渐下降(P