细胞凋亡在重症急性胰腺炎并发急性肺损伤中的作用机制

目的探讨细胞凋亡在重症急性胰腺炎（SAP）并发急性肺损伤（ALI）中的作用,并从Notch/Hes信号转导方面探讨其作用机制。方法 50只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（n=8）和模型组（n=42）,模型组采用胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠的方法建立SAP并发ALI模型,并随机分为模型3h组（n=10）、模型6h组（n=10）、模型12h组（n=10）和模型24h组（n=12）。计算肺组织湿/干重比值（W/D）,光镜下进行胰腺和肺组织病理评分,酶化学法测定肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性,放射免疫分析法测定肺组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡并计算凋亡指数（AI）,Western blotting方法测定Notch-1、Hes-1和Hes-5蛋白的表达水平。结果模型大鼠的肺组织W/D呈现逐级增高趋势,各组均明显高于假手术组（P〈0.01）,其中模型12h组达到峰值;各模型组胰腺病理评分和肺组织病理评分均较假手术组明显提高（P〈0.01）,模型12h组最高;各模型组肺组织MPO和TNF-α水平改变与肺组织病理评分呈现相同趋势;各模型组大鼠肺组织细胞凋亡指数（AI）均较假手术组明显增高（P〈0.01）。Western blotting检测结果提示,4个模型组Notch-1蛋白表达水平均较假手术组下降,其中模型3h、模型6h和模型12h三组与假手术组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,模型12h组Notch-1蛋白表达水平最低,明显低于模型3h组、模型6h组和模型24h组（P〈0.01）。相关性分析显示,肺组织AI与肺损伤病理评分呈显著负相关（r=–0.834,P〈0.01）;模型Notch-1蛋白表达水平与肺组织AI呈显著正相关（r=0.515,P=0.004）,与肺组织W/D（r=–0.593,P=0.001）、肺组织病理评分（r=–0.306,P=0.002）、MPO活性（r=–0.687,P〈0.01）及TNF-α水平（r=–0.574,P=0.001）呈显著负相关。结论 SAP并发ALI过程中,肺组织细胞凋亡增加对减轻肺损伤起重要作用,SAP时Notch-1信号表达受限是肺损伤恶化的重要机制。