稳定表达FIP1L1-PDGFRA及其突变体细胞株的构建和耐药性评价

稳定表达FIP1L1-PDGFRA及其突变体细胞株的构建和耐药性评价

R967; 目的 构建能稳定表达 FIP1L1-PDGFRA融合基因(F/P)及其 T674I和 D842V突变体的小鼠原 B细胞株BaF3-F/P、BaF3-F/P-T674I和BaF3-F/P-D842V,并通过考察它们对酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的响应以评价其活性.方法 用慢病毒感染技术将目的基因导入BaF3 细胞;RT-qPCR检测mRNA表达;CCK-8 法检测TKIs对稳转细胞株增殖的抑制作用.结果 构建的 BaF3-F/P、BaF3-F/P-T674I和 BaF3-F/P-D842V细胞株均能转录 FIP1L1 和PDGFRA mRNA,并表现出不依赖IL-3增殖的恶性表型特征...

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Veröffentlicht in:基础医学与临床 2024, Vol.44 (1), p.63-68
Hauptverfasser: 刘婧雯, 宋昊昕, 朱蕾
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:R967; 目的 构建能稳定表达 FIP1L1-PDGFRA融合基因(F/P)及其 T674I和 D842V突变体的小鼠原 B细胞株BaF3-F/P、BaF3-F/P-T674I和BaF3-F/P-D842V,并通过考察它们对酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的响应以评价其活性.方法 用慢病毒感染技术将目的基因导入BaF3 细胞;RT-qPCR检测mRNA表达;CCK-8 法检测TKIs对稳转细胞株增殖的抑制作用.结果 构建的 BaF3-F/P、BaF3-F/P-T674I和 BaF3-F/P-D842V细胞株均能转录 FIP1L1 和PDGFRA mRNA,并表现出不依赖IL-3增殖的恶性表型特征以及对相应TKIs的敏感性.结论 成功构建了能稳定表达F/P及其T674I、D842V突变体的小鼠原B细胞株,为开发以此为靶点的化合物提供良好的细胞模型.
ISSN:1001-6325
DOI:10.16352/j.issn.1001-6325.2024.01.0063