体外沉默Rce1对舌鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移能力的影响

R739.8; 目的 通过RNA干扰技术沉默Rce1基因,探讨Rce1对舌癌细胞侵袭和迁移能力的影响.方法 体外培养舌鳞状细胞癌Cal-27和SCC-4细胞,设计合成Rce1基因的小干扰RNA(siRNA),采用脂质体载体瞬时转染沉默Rce1基因.根据转染的siRNA不同,将实验组分为Rce1-siRNA-1组、Rce1-siRNA-2组、Rce1-siRNA-3组,脂质体载体分别转染相对应序列的siRNA.脂质体转染siCON作为阴性对照组,不转染siRNA作为空白对照组.采用实时定量聚合酶链反应检测各组Rce1、RhoA以及K-Ras基因的表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测...

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Veröffentlicht in:华西口腔医学杂志 2019-04, Vol.37 (2), p.143-148
Hauptverfasser: 孙君君, 陶匀雅, 周元, 何宗轩, 盛善桂, 王奇民, 童磊, 赵开, 王少如, 陈正岗
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:R739.8; 目的 通过RNA干扰技术沉默Rce1基因,探讨Rce1对舌癌细胞侵袭和迁移能力的影响.方法 体外培养舌鳞状细胞癌Cal-27和SCC-4细胞,设计合成Rce1基因的小干扰RNA(siRNA),采用脂质体载体瞬时转染沉默Rce1基因.根据转染的siRNA不同,将实验组分为Rce1-siRNA-1组、Rce1-siRNA-2组、Rce1-siRNA-3组,脂质体载体分别转染相对应序列的siRNA.脂质体转染siCON作为阴性对照组,不转染siRNA作为空白对照组.采用实时定量聚合酶链反应检测各组Rce1、RhoA以及K-Ras基因的表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测Rce1、RhoA、K-Ras、金属基质蛋白酶(MMP)-2及MMP-9的表达,采用体外侵袭实验检测Cal-27和SCC-4的侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力.结果 实时定量聚合酶链反应及Western blot检测结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比,实验组的Rce1基因及蛋白表达均下调(P0.05),MMP-2、MMP-9表达下降(P
ISSN:1000-1182
DOI:10.7518/hxkq.2019.02.004