重组质粒pcDNA3—gtfB在哺乳动物细胞中的表达

目的：检测含有变形链球菌葡糖基转移酶抗原基因（gtfB)的重组质粒pcDNA3-gtfB能否在哺乳动物细胞COS－1中正确地转录和表达。方法：采用脂质体介导法，将pcDNA3-gtfB转染哺乳动物细胞COS－1，采用RT－PCR法、免疫组化LSAB法、Western免疫印迹法检测重组质粒的转录水平和表达产物。结果：pcDNA3-gtfB在转染COS－1细胞后具有转录和翻译活性，蛋白质表达产物分子量为116－212kD，且可与兔抗葡糖基转移酶抗体发生特异性结合。结论：重组质粒pcDNA3-gtfB在哺乳动物细胞中能正确地转录和表达，为其作为基因疫苗进行动物实验提供了依据。