奥氮平通过抑制载脂蛋白A5分泌导致非酒精性脂肪性肝病

目的:奥氮平是最常用第2代抗精神病药,若长期服用会显著增加发生非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的风险,但其发病机制不明.肝内脂肪过度沉积是NAFLD的病理基础,且与肝内TG代谢障碍密切相关.载脂蛋白A5(apolipoprotein A5,ApoA5)是体内TG代谢的关键调节因子,促进肝细胞内TG蓄积,参与NAFLD发病.然而,奥氮平是否通过ApoA5诱发NAFLD尚无报道.本研究探讨ApoA5是否参与奥氮平相关NAFLD的发病.方法:从动物实验、细胞实验及ApoA5基因敲低实验3个层次上进行探讨.将6周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、低剂量组、高剂量组,分别给予10％DMSO、3 mg/(kg·d)奥氮平、6 mg/(kg·d)奥氮平.干预8周后,测定各组小鼠的血脂4项、肝转氨酶2项和ApoA5水平.HepG2细胞分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,分别给予0.1％DMSO、25μmol/L奥氮平、50μmol/L奥氮平、100μmol/L奥氮平干预24 h.对100μmol/L奥氮平预处理的HepG2细胞分别转染ApoA5 siRNA或scrambled siRNA(阴性对照).采用油红O染色观察肝组织和肝细胞中的脂滴;HE染色观察肝组织脂质沉积情况;实时PCR检测ApoA5 mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测ApoA5蛋白质表达水平.结果:3或6 mg/(kg·d)的奥氮平干预后,各组小鼠体重差异无统计学意义(P>0.05),血浆TG、ALT和AST水平呈剂量依赖性升高,血浆ApoA5水平呈剂量依赖性降低(均P0.05).肝组织中ApoA5蛋白质水平呈剂量依赖性升高(均P0.05).对照组小鼠肝组织结构完整,肝细胞形态规则,细胞内仅见少量散在脂滴;给予3或6 mg/(kg·d)奥氮平的小鼠肝细胞内可见大量脂肪沉积,细胞呈气球样变,充盈着大量的脂滴空泡,细胞核位于细胞边缘,红色脂滴数量明显增多,且高剂量组更明显.25、50、100μmol/L的奥氮平干预HepG2细胞24 h后,细胞内脂滴数量明显增多和体积明显增大,且给药剂量越高变化越明显;细胞中ApoA5蛋白质水平