BDNF基因转染促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化

目的:将脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)基因转入骨髓问充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC),使其作为种子细胞和基因治疗的载体将BDNF基因导入脊髓损伤组织,为探索一种更为有效的脊髓损伤治疗方法提供实验基础。方法:分离、培养、鉴定大鼠骨髓间充质干细胞;实验组应用已构建的pEGFP—N1-BDNF进行基因转染,空质粒组用pEGFP-N1空质粒进行转染,阴性对照组只加入培养基,并进行Western印迹分析;将转染BDNF的实验组、转染空质粒组和未转染的阴性对照组细胞在体外向神经元样细胞诱导分化,比较3组细...

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Veröffentlicht in:中南大学学报(医学版) 2012, Vol.37 (5), p.441-446
1. Verfasser: 刘伟东 吕国华 王冰 马泽民 李亚伟
Format: Artikel
Sprache:chi
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的:将脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)基因转入骨髓问充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC),使其作为种子细胞和基因治疗的载体将BDNF基因导入脊髓损伤组织,为探索一种更为有效的脊髓损伤治疗方法提供实验基础。方法:分离、培养、鉴定大鼠骨髓间充质干细胞;实验组应用已构建的pEGFP—N1-BDNF进行基因转染,空质粒组用pEGFP-N1空质粒进行转染,阴性对照组只加入培养基,并进行Western印迹分析;将转染BDNF的实验组、转染空质粒组和未转染的阴性对照组细胞在体外向神经元样细胞诱导分化,比较3组细胞诱导后神经元样细胞分化率,并进行统计学分析。结果:流式细胞检测培养细胞CD90(+),CD44(+),CD34(-)、CD45(-);经Western印迹检测证实实验组MSC表达BDNF—EGFP;实验组细胞向神经元样细胞分化率高于空质粒组和未转染的阴性对照组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:BDNF基因转染MSC后,可以促进其向神经元样细胞分化,BDNF在MSC向神经元样细胞分化过程中具有重要作用。
ISSN:1672-7347
DOI:10.3969/j.issn.1672-7347.2012.05.002