cry基因保守序列克隆及其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达

S; [目的]对cry基因保守序列进行克隆,并使其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达。[方法]根据NCBI数据库信息设计引物序列,采用PCR技术从抗虫棉基因组DNA中扩增出抗虫基因cry的保守序列,构建重组载体并转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中,利用pGEX原核表达系统诱导蛋白表达。同时,分析了不同IPTG浓度及不同诱导时间对蛋白表达量的影响。[结果]扩增出抗虫基因cry的两段保守序列,长度分别为304和853bp;SDSPAGE检测结果显示,经IPTG诱导后重组质粒pGEX4t1304和pGEX4t1853成功地表达了大量GST融合蛋白,分子量分别为39和62.4kDa...

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Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:农业科学与技术:英文版 2012, Vol.13 (5), p.958-996
Hauptverfasser: 罗翠平, 李金华, 谢烨明, 曾万勇
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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