4种高梁基因组DNA快速提取方法的比较

S514; [目的]寻找快速、简单、成本低的高粱基因组DNA提取方法.[方法]首先,分别使用液氮研磨法、缓冲液研磨法、烘干研磨法和直接研磨法这4种方法从高粱叶片中提取基因组DNA,然后,通过凝胶电泳、SSR分析和SRAP分析检测所提DNA的浓度和纯度.[结果]采用4种方法提取高粱基因组DNA时的产量相差不大;采用前2种方法提取的DNA降解少,纯度高,可进行有效的SRAP-PCR和SSR-PCR,但缓冲液研磨法的SRAP-PCR结果稍差;而采用后两种方法提取的DNA降解严重,纯度低,但可进行有效的SSR-PCR.[结论]采用4种方法均可在短时间内提取到足够几十次PCR反应的高粱基因组DNA,液氮...

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Veröffentlicht in:农业科学与技术(英文版) 2011, Vol.12 (5), p.686-744
Hauptverfasser: 高建明, 夏卜咸, 杨洪, 曲荣桂, 桂枝, 罗峰, 裴忠有, 孙守钧
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:S514; [目的]寻找快速、简单、成本低的高粱基因组DNA提取方法.[方法]首先,分别使用液氮研磨法、缓冲液研磨法、烘干研磨法和直接研磨法这4种方法从高粱叶片中提取基因组DNA,然后,通过凝胶电泳、SSR分析和SRAP分析检测所提DNA的浓度和纯度.[结果]采用4种方法提取高粱基因组DNA时的产量相差不大;采用前2种方法提取的DNA降解少,纯度高,可进行有效的SRAP-PCR和SSR-PCR,但缓冲液研磨法的SRAP-PCR结果稍差;而采用后两种方法提取的DNA降解严重,纯度低,但可进行有效的SSR-PCR.[结论]采用4种方法均可在短时间内提取到足够几十次PCR反应的高粱基因组DNA,液氮研磨法和缓冲液研磨法所提取的DNA应用范围更大,而烘干研磨法和直接研磨法所提取的DNA只能用于对片段较小的目的DNA进行特异性PCR.
ISSN:1009-4229
DOI:10.3969/j.issn.1009-4229-B.2011.05.017