8-(6-氨基己烷)－氨基－NADH的制备和表征

8-(6-氨基己烷)－氨基－NADH的制备和表征

Q554; 采用1,6-己二胺对烟酰胺辅酶(NADH)的腺嘌呤C8位点进行定点修饰,通过DEAE-Sepharose层析分离得到产物8-(6-氨基己烷)-氨基-NADH.经优化制备过程和分离条件,其收率可达60%.在pH 2.2～8.0内系统考察了修饰产物的pH稳定性,结果表明在不同种类的缓冲液中,修饰后辅酶的稳定性均有显著提高,在pH 6.5的柠檬酸盐和pH 8.0的磷酸盐缓冲液中,半衰期分别延长11和5倍.通过利用乳酸脱氢酶(LDH)和谷氨酸脱氢酶(GDH)测定修饰前后辅酶的活性,发现相同反应条件下修饰后辅酶的反应速率分别是天然NADH的3.0～3.8倍(LDH)和1.3～1.4倍(GDH...

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Veröffentlicht in:过程工程学报 2009, Vol.9 (5), p.975-980
Hauptverfasser: 马洪静, 王平, 苏志国, 张松平
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:Q554; 采用1,6-己二胺对烟酰胺辅酶(NADH)的腺嘌呤C8位点进行定点修饰,通过DEAE-Sepharose层析分离得到产物8-(6-氨基己烷)-氨基-NADH.经优化制备过程和分离条件,其收率可达60%.在pH 2.2～8.0内系统考察了修饰产物的pH稳定性,结果表明在不同种类的缓冲液中,修饰后辅酶的稳定性均有显著提高,在pH 6.5的柠檬酸盐和pH 8.0的磷酸盐缓冲液中,半衰期分别延长11和5倍.通过利用乳酸脱氢酶(LDH)和谷氨酸脱氢酶(GDH)测定修饰前后辅酶的活性,发现相同反应条件下修饰后辅酶的反应速率分别是天然NADH的3.0～3.8倍(LDH)和1.3～1.4倍(GDH).
ISSN:1009-606X
DOI:10.3321/j.issn:1009-606X.2009.05.024