高血压大鼠SLC7A8基因腺病毒载体的构建及鉴定

高血压大鼠SLC7A8基因腺病毒载体的构建及鉴定

目的 构建携带SLC7A8基因的重组腺病毒载体,为进一步研究SLC7A8基因的功能作准备.方法 含SLC7A8目的 基因编码序列（coding domain sequence,CDS）的互补DNA（complementary DNA,cDNA）的pGEM-T Easy载体测序分析正确后,再将其连接入重组腺病毒载体.以双酶切和测序鉴定正确后,将pAdxsi-GFP-SLC7A8重组腺病毒载体转染大鼠肾小管上皮细胞（rat renal tubular epithelial cells-52e,NRK-52E）,流式细胞仪测定转染效率,反转录聚合酶链反应法检测转染后SLC7A8 mRNA的表达.结果...

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Veröffentlicht in:河北医科大学学报 2012, Vol.33 (1), p.8-11
1. Verfasser: 洪承吕 王本极 杨德业 张怀勤
Format: Artikel
Sprache:chi
Schlagworte:
基因
大鼠
腺病毒科
高血压
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的 构建携带SLC7A8基因的重组腺病毒载体,为进一步研究SLC7A8基因的功能作准备.方法 含SLC7A8目的 基因编码序列（coding domain sequence,CDS）的互补DNA（complementary DNA,cDNA）的pGEM-T Easy载体测序分析正确后,再将其连接入重组腺病毒载体.以双酶切和测序鉴定正确后,将pAdxsi-GFP-SLC7A8重组腺病毒载体转染大鼠肾小管上皮细胞（rat renal tubular epithelial cells-52e,NRK-52E）,流式细胞仪测定转染效率,反转录聚合酶链反应法检测转染后SLC7A8 mRNA的表达.结果 pAdxsi- GFP-SLC7A8重组腺病毒载体构建成功,流式细胞仪测定重组腺病毒载体转染NRK-52E效率为94.1%,且证实转染后肾小管上皮细胞的SLC7A8 mRNA表达.结论 本研究成功构建pAdxsi-GFP-SLC7A8重组腺病毒载体,并成功转染NRK-52E细胞,这为我们进一步探索SLC7A8基因的生物学功能奠定了基础.
ISSN:1007-3205
DOI:10.3969/j.issn.1007-3205.2012.01.004