葫芦茶苷保护活性氮诱导内皮细胞线粒体损伤的作用研究

R285; 目的:通过葫芦茶苷作用于活性氮致血管内皮细胞损伤模型,探讨其对血管内皮细胞损伤的保护作用.方法:采用MTT比色法检测葫芦茶苷在5～160μmol/L浓度范围对EA.hy 926内皮细胞存活率的影响;EA.hy 926内皮细胞预给药葫芦茶苷1 h后,给予0.5 mmol/L S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)损伤内皮细胞12 h,通过MTT比色法检测葫芦茶苷对EA.hy 926细胞存活率的影响;Real-time PCR法检测EA.hy 926细胞线粒体特异性因子细胞色素氧化酶1(COX-1)、NADH脱氢酶亚单位1(ND-1)和炎症因子白介素-1β(IL-1β)基因的表达效果,同时采用Western blot法检测Bcl-2关联X蛋白(Bax)和B细胞肿瘤因子2(Bcl-2)经时蛋白表达量的变化;通过线粒体膜电位荧光探针(JC-1)检测葫芦茶苷对EA.hy 926细胞线粒体膜电位的变化规律.结果:MTT法结果表明葫芦茶苷在5～160μmol/L范围内对EA.hy 926细胞无明显细胞毒性且最佳药物保护浓度为40μmol/L.Western Blot法显示GSNO经时损伤EA.hy 926细胞后Bax蛋白表达量呈时间依赖性增高,Bcl-2蛋白表达量与之相反.Real time-PCR结果显示,葫芦茶苷能明显上调COX-1基因(P