乳糖代替IPTG诱导己糖激酶在大肠杆菌中的表达

构建了己糖激酶GLK高效表达的工程菌株BL21(DE3)/pET—glk,考察了乳糖代替IPTG诱导己糖激酶GLK在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性。实验结果表明,工程菌对数生长中期(OD。00约为1.0)添加终浓度为10dL的乳糖于25℃的条件下诱导6h能获得最大量的目的蛋白和菌体量,目的蛋白表达量占总蛋白的30.45%,与IPTG诱导条件下的31.12%无明显差异。同时,乳糖诱导后收获的菌体量高于IPTG诱导,显示出了乳糖同样是一种T7启动子的廉价高效诱导剂,可以代替昂贵的IPTG用于己糖激酶GLK的规模化发酵,也为其他重组蛋白的生产提供了有益的参考和借鉴。...

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Veröffentlicht in:Gongye weishengwu 2011, Vol.41 (1), p.15-20
1. Verfasser: 孔董俊 李玉 张俊环 贾红红 路福平 杜连祥
Format: Artikel
Sprache:chi
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Beschreibung
Zusammenfassung:构建了己糖激酶GLK高效表达的工程菌株BL21(DE3)/pET—glk,考察了乳糖代替IPTG诱导己糖激酶GLK在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性。实验结果表明,工程菌对数生长中期(OD。00约为1.0)添加终浓度为10dL的乳糖于25℃的条件下诱导6h能获得最大量的目的蛋白和菌体量,目的蛋白表达量占总蛋白的30.45%,与IPTG诱导条件下的31.12%无明显差异。同时,乳糖诱导后收获的菌体量高于IPTG诱导,显示出了乳糖同样是一种T7启动子的廉价高效诱导剂,可以代替昂贵的IPTG用于己糖激酶GLK的规模化发酵,也为其他重组蛋白的生产提供了有益的参考和借鉴。
ISSN:1001-6678
DOI:10.3969/j.issn.1001-6678.2011.01.004