敲除ACSL3增加HCC细胞对葡萄糖缺乏敏感性

R114; 目的:研究长链脂酰辅酶A合成酶3(ACSL3)在代谢应激下对肝细胞癌(HCC)细胞Huh7存活的影响.方法:从TCGA-LICH数据库下载HCC患者RNA表达谱和临床数据,统计ACSL3在HCC患者中的表达情况,绘制Kaplan-Meier生存曲线;在广西医科大学第一附属医院的HCC队列中收集44例原发性HCC患者组织和癌旁组织样本,通过免疫组化检测ACSL3的表达;利用siRNA和CRISPR/CAS 9技术沉默/敲除Huh7细胞中的ACSL3基因,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、克隆形成实验和Transwell侵袭实验检测ACSL3敲除对Huh7细胞增殖和侵袭能力的影响....

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Veröffentlicht in:广西医科大学学报 2023, Vol.40 (4), p.603-610
Hauptverfasser: 宾金莲, 冯吉, 周静, 吴勇, 崔旋, 黄晓薇, 卢国栋
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:R114; 目的:研究长链脂酰辅酶A合成酶3(ACSL3)在代谢应激下对肝细胞癌(HCC)细胞Huh7存活的影响.方法:从TCGA-LICH数据库下载HCC患者RNA表达谱和临床数据,统计ACSL3在HCC患者中的表达情况,绘制Kaplan-Meier生存曲线;在广西医科大学第一附属医院的HCC队列中收集44例原发性HCC患者组织和癌旁组织样本,通过免疫组化检测ACSL3的表达;利用siRNA和CRISPR/CAS 9技术沉默/敲除Huh7细胞中的ACSL3基因,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、克隆形成实验和Transwell侵袭实验检测ACSL3敲除对Huh7细胞增殖和侵袭能力的影响.在完全培养基和葡萄糖缺乏条件下,通过细胞流式术检测对照组细胞和ACSL3沉默/敲除组细胞的死亡,并检测细胞中ATP、β-羟基丁酸的变化.结果:与正常肝组织相比,HCC组织的ACSL3表达较高(P
ISSN:1005-930X
DOI:10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.04.012