β-catenin通过ASK1抑制铜绿假单胞菌引起的炎性反应

R440; 目的 探讨β-catenin抑制铜绿假单胞菌感染引起的炎性反应的机制.方法 采用普通聚合酶联反应(PCR)的方法和Western-blot的方法在过表达β-catenin的RAW264.7细胞和对照细胞中验证差异表达细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)转录水平和蛋白的表达;应用小干扰RNA(siRNA)沉默ASK1,在铜绿假单胞菌感染的RA W264.7细胞中,检测炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β的表达;构建铜绿假单胞菌角膜炎的动物模型,应用siRNA沉默ASK1,观察ASK1在体内对炎性反应的调控;应用ASK1质粒,在过表达β-cate-nin的RAW264.7细胞中,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测细胞因子IL-6和IL-1β的基因水平,观察ASK1对β-catenin介导的炎性反应的回复作用.结果 在过表达β-catenin的RAW264.7细胞中ASK1的转录水平和蛋白水平明显降低.在感染铜绿假单胞菌后,沉默ASK1可抑制炎症因子IL-6和IL-1β的表达;构建铜绿假单胞菌角膜炎的动物模型,实验结果发现沉默ASK1后临床评分降低,角膜炎症程度和范围降低,同时可抑制角膜中IL-6和IL-1β的表达.进一步机制探讨发现ASK1可减弱β-catenin对炎症的抑制作用.结论 β-catenin通过调控ASK1抑制铜绿假单胞菌感染引起的炎性反应.