用金纳米-分子信标的荧光定量PCR新技术研究6个miRNAs在心肌缺血患者中的表达

目的探讨新建立金纳米-分子信标探针的实时荧光定量PCR技术及其分析不同程度心肌缺血患者的6个微小RNA（microRNA,miRNA）：miRNA-1、miRNA-21、miRNA-133、miRNA-199、miRNA-208、miRNA-499的表达水平。方法用新构建金纳米-分子信标探针引入实时荧光定量PCR技术分析200例不同程度心肌缺血患者血清中的以上6个miRNAs的表达水平,并用xMAP液态芯片技术验证以上miRNAs的表达。结果急性心肌缺血组：在急性心肌梗死（AMI）发病后1～3h检测到miRNA-21、miRNA-133、miRNA-199、miRNA-208、miRNA-499的表达上调;慢性心肌缺血组：通过对原发性高血压并发心肌缺血患者研究显示miRNA-21、miRNA-133、miRNA-199、miRNA-1的表达上调,以上两组分别与健康对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.001）。新构建的金纳米-分子信标探针检测的特异度为86.7%,灵敏度为90.2%,均高于常规分子信标（53.4%、66.8%）,两种方法比较差异有统计学意义（P〈0.001）,与xMAP液态芯片技术比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论新建立的金纳米-分子信标探针的实时荧光定量PCR技术可作为早期检测miRNAs新的实验方法,为心肌梗死患者的早期诊断提供新的检测手段。