小鼠肝星状细胞的分离纯化新方法的建立与应用

目的介绍一种简便、经济、高产的小鼠肝星状细胞（HSC）分离方法,为肝纤维化的研究提供细胞模型。方法参照国内外方法并加以改良,采用酶灌注预消化及随后的震荡充分消化,合并Medimachine系统制成单细胞悬液。用人淋巴细胞分离液直接铺梯度,采用单层梯度离心法一步分离HSC。结果两只小鼠HSC得率可达1×10^6个,台盼蓝染色显示细胞活率达92%。初分离的HSC在328nm激发光下自发蓝绿色荧光,油红染色及结蛋白免疫细胞化学染色鉴定纯度达90%。结论建立了一种实用的小鼠HSC分离方法,可用于肝纤维化和原代HSC的生物学行为研究。该方法简便、实用、高产,不需特殊设备,便于推广应用。