茄子褐纹病菌的分离鉴定及产孢条件的优化

S432.4+4; [目的]由茄褐纹拟茎点霉(Phomopsis vexans Harter)引起的褐纹病是当前茄子产业的重要病害,孢子富集是深入研究褐纹病菌孢子萌发及其致病机理的基础.进一步简化当前复杂的产孢过程,提高产孢效率.[方法]采用组织分离法开展病原菌的分离纯化,利用形态学特征观察及rDNA-ITS序列分析对病原菌进行鉴定;使用液体培养的方式,对茄子褐纹病菌的产孢条件进行优化.[结果]分离获得的病原菌rDNA-ITS序列经NCBI序列比对,与茄子褐纹病菌遗传关系最近,同源性达99％;相同培养条件下培养1 d后,液体培养基中的菌丝生长量较大;28℃培养1 d 24℃培养3 d后的产孢量为1.2×1010个/mL,大于24℃培养4 d的产孢量(6×107个/mL);不同培养温度产孢量分别为2.5×107(20℃)、1.2×1010(22℃)、9.4×109(24℃)、8.5×108(26℃)个/mL;相同培养条件下,25％ 葡萄糖马铃薯液体(PDB)培养基产孢量最高(1.2×1010个/mL).[结论]分离并鉴定了茄褐纹病病原菌,优化了褐纹病菌产孢条件.优化后的产孢条件为:在150 r/min摇床中,使用25％葡萄糖PDB培养基28℃培养1 d后24℃培养3 d.