抗TMV、CMV转基因烟草的初步选育

将烟草花叶病毒复制酶54 KD蛋白基因构建到质粒pSSZ32.54K,导入根癌农杆菌EHA105株系,用农杆菌介导的叶盘法转化含CMV CP基因的纯合系烟草,获得了含CMV CP基因和TMV RepE基因的转基因烟草,以及只含TMV RepE基因的转基因烟草。以繁殖于新鲜普通烟叶片上的TMV为毒源,机械摩擦接种含双基因的烟草和只含CMV CP基因的烟草。接种15 d后,观察植株发病情况,发现转双基因的烟草无花叶症状出现,而对照植株（只含CMV CP基因）出现花叶症状。通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测病毒含量,发现转基因植株体内无病毒积累,而对照植株体内有病毒积累。因此,含RepE基因的烟草对TMV有一定抗性。