BVDV荧光RT—PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）毒株序列，选择5’NTR保守区域设计1对特异性引物和1条Taqman探针，通过矩阵法筛选引物探针的最佳浓度，建立了检测BVDV的荧光RT—PCR方法。结果显示，用1．5μL上下游引物混合液（10μmol／L）0．5μL探针溶液（10μmol／L）对BVDV进行检测，可获得较小Ct值、较高吸光值，并可降低检测成本。对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验，结果表明，该方法敏感性高、特异性强、重复性好。将该方法应用在疫苗生产中，可快速准确地筛选出合格的原辅材料和半成品，为生产提供及时准确可靠的数据。