双链特异性核酸切割酶等温循环扩增结合 高效液相色谱高灵敏检测双目标microRNA

双链特异性核酸切割酶等温循环扩增结合 高效液相色谱高灵敏检测双目标microRNA

通过双链特异性核酸切割酶(DSN)循环扩增策略结合高效液相色谱(HPLC)法,实现了对两种疾病标志物microRNA(miRNA)的选择性分离和高灵敏检测.采用酶循环等温扩增策略增强了目标miRNA的信号,提高了HPLC法检测核酸的灵敏度.利用固定在磁珠上的不同长度和碱基序列的DNA探针实现了不同miRNA信号的色谱分离,磁性分离使背景噪音最小化,动态范围扩大.对目标miRNA-155的检出限为0.30 fmol/L,对miRNA-21的检出限为0.24 fmol/L.将本方法用于检测红斑狼疮、宫颈癌和卵巢癌血清样本中的miRNA-155和miRNA-21,结果与实时荧光定量聚合酶链式反应(q...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:分析化学 2021, Vol.49 (2), p.216-225
Hauptverfasser: 祁桐, 宋畅, 陈文慧, 唐良秀, 鞠嘉和, 沈薇, 孔德昭, 唐盛
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Beschreibung
Zusammenfassung:通过双链特异性核酸切割酶(DSN)循环扩增策略结合高效液相色谱(HPLC)法,实现了对两种疾病标志物microRNA(miRNA)的选择性分离和高灵敏检测.采用酶循环等温扩增策略增强了目标miRNA的信号,提高了HPLC法检测核酸的灵敏度.利用固定在磁珠上的不同长度和碱基序列的DNA探针实现了不同miRNA信号的色谱分离,磁性分离使背景噪音最小化,动态范围扩大.对目标miRNA-155的检出限为0.30 fmol/L,对miRNA-21的检出限为0.24 fmol/L.将本方法用于检测红斑狼疮、宫颈癌和卵巢癌血清样本中的miRNA-155和miRNA-21,结果与实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)结果相当.
ISSN:0253-3820
DOI:10.19756/j.issn.0253-3820.201298