液相色谱-串联质谱法同时检测DNA中3-甲基腺嘌呤和3-乙基腺嘌呤

利用阳离子交换固相萃取柱( Waters Oasis MCX)富集净化 DNA样品,建立了液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)同时检测DNA中3-甲基腺嘌呤(N3-MeA)和3-乙基腺嘌呤(N3-EtA)的方法。采用氘代-3-甲基腺嘌呤( d3-N3-MeA)和氘代-3-乙基腺嘌呤( d5-N3-EtA)为内标；进样量3μL,分析时间为13 min；亲水相互作用色谱柱(Waters XBridge HILIC)进行液相分离,流动相为10 mmol/L甲酸铵-乙腈溶液(5：95, V/V, pH=4.0),流速250μL/min；质谱条件：电喷雾离子源,多反应监测正离子扫描方式；电喷雾电压：5500 V,雾化气：369 Pa,气帘气：185 Pa,电离温度：400℃,驻留时间：40 ms。本方法对N3-MeA和N3-EtA的检出限分别为0.043和0.007μg/L,方法回收率为87.8%~103.0%。采用本方法检测了卷烟烟气粒相物暴露的DNA中N3-MeA和N3-EtA含量。结果表明,卷烟烟气粒相物暴露后的小牛胸腺DNA中3-甲基腺嘌呤和3-乙基腺嘌呤可被本方法定量检出。