基于砷和汞离子标记 SiO2@Au 纳米探针的超敏多元免疫分析方法研究

构建了一种基于 As3+和 Hg2+标记 SiO2@ Au 复合纳米探针(NPs)，以及氢化物发生-原子荧光(HG-AFS)同时检测癌胚抗原(CEA)和糖蛋白19-9(CA 19-9)的超灵敏多元免疫分析方法。采用氨基化 SiO2(核)@ Au NPs(壳)分别吸附 As3+和 Hg2+，并标记 CEA 和 CA 19-9的第二抗体(Ab2)，由此获得了富 As(或 Hg)型信号探针(As (Hg)-SiO2@ Au-Ab2)。基于夹心免疫分析方法，将两种信号探针和对应的抗原以及96孔板上一抗，在板底形成两种免疫复合物(Ab 1/ Ag/ As(Hg)-SiO2@ Au-Ab2)，利用 HG-AFS 同时检测 As3+和 Hg2+，其与 CEA 和 CA 19-9的含量对数值成正比，可用于定量分析。此类探针不仅具有良好的分散性、还具有出色的信号放大效果。优化了探针合成和最佳反应条件，并对探针制备过程进行了表征。本方法与 CEA 和 CA 19-9分别在0.001~100μg/ L 和0.01~80 U/ mL 范围内呈线性关系，检出限分别为0.5 ng/ L 和0.005 U/ mL (3σ)，低于标准 ELISA 方法3个数量级。用于血清样品中 CEA 和 CA 19-9同时检测，并与标准 ELISA 方法对照，结果一致。此免疫分析方法灵敏、简便、一次可实现多个肿瘤标志物检测，适合于基层卫生部门进行恶性肿瘤早期筛查。