甲氧基有机磷杀虫剂广谱特异性抗体的制备

O6; 以通用结构O,O-二甲基硫代磷酸酯为目标检测基团,制备针对甲氧基有机磷杀虫剂的广谱特异性抗体.利用O,O-二甲基硫代磷酸钠和氯乙酸合成半抗原S-羧甲基-O,O-二甲基二硫代磷酸酯(CMP),通过混合酸酐法(MA)和活性酯法(AE)分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联.CMP-MA-BSA、CMP-AE-BSA作为免疫原均获得了免疫应答.其中,CMP-AE-BSA所获得的抗血清效价最高,为256000.研究了有机溶剂种类及含量、pH因素对ELISA曲线的影响,确定CMP酶联免疫分析方法(ELISA)的最佳工作条件,CMP的最低检测浓度为0.076 μg/L,IC50为93....

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Veröffentlicht in:分析化学 2008, Vol.36 (5), p.647-652
Hauptverfasser: 梁颖, 刘媛, 祝金凤, 樊明涛, 刘贤进
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:O6; 以通用结构O,O-二甲基硫代磷酸酯为目标检测基团,制备针对甲氧基有机磷杀虫剂的广谱特异性抗体.利用O,O-二甲基硫代磷酸钠和氯乙酸合成半抗原S-羧甲基-O,O-二甲基二硫代磷酸酯(CMP),通过混合酸酐法(MA)和活性酯法(AE)分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联.CMP-MA-BSA、CMP-AE-BSA作为免疫原均获得了免疫应答.其中,CMP-AE-BSA所获得的抗血清效价最高,为256000.研究了有机溶剂种类及含量、pH因素对ELISA曲线的影响,确定CMP酶联免疫分析方法(ELISA)的最佳工作条件,CMP的最低检测浓度为0.076 μg/L,IC50为93.97 μg/L.以14种常见有机磷杀虫剂为对象,检测抗体对其交叉反应,测定结果表明:抗体对马拉硫磷、稻丰散、乐果、亚胺硫磷、倍硫磷、甲基嘧啶磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷及杀扑磷等均有识别作用.IC50分别为69.92、136.90、230.39、416.84、508.57、510.38、607.21、835.30和850.21 μg/L.该技术可用于多种甲氧基有机磷杀虫剂的快速定性或半定量检测.
ISSN:0253-3820
DOI:10.3321/j.issn:0253-3820.2008.05.017