鼻咽癌组织中EBV潜伏膜蛋白2跨膜区CTL表位序列分析

背景与目的：Epstein-Barr病毒在华南地区鼻咽癌细胞中表达核抗原1（EBNA1）、潜伏膜蛋白1（LMP1）和潜伏膜蛋白2（LMP2）等病毒蛋白质。LMP2 mRNA不仅几乎100％表达于鼻咽肿瘤细胞，而且LMP2蛋白还具有较强的免疫原性，是一个较理想的免疫治疗靶点。本研究分析广州地区来源鼻咽癌组织的LMP2基因跨膜区的CTL表位序列，为设计以LMP2抗原为靶点的鼻咽癌免疫治疗提供依据。方法：收集广州地区鼻咽癌患者鼻咽活检组织20例和正常鼻咽粘膜活检组织3例，提取DNA，半巢式PCR扩增LMP2基因跨膜区．直接测序．分析CTL表位序列。结果：与标准株B95．8相比．鼻咽癌和正常鼻咽粘膜活检组织来源的LMP2基因跨膜区存在14处碱基替换，形成6处氨基酸替换．导致4处CTL表位序列变异（SSC、TYG、CLG和VMS），其中VMS多态性为初次报道。由于从鼻咽癌组织扩增的LMP2序列与从正常鼻咽粘膜扩增的LMP2序列相同，表明这些变化是地域相关的病毒多态性而非鼻咽癌相关的病毒变异。结论：广州地区来源的Epstein-Barr病毒LMP2基因存在多态性．产生4处CTL表位序列变化。在设计以LMP2为靶点的免疫治疗时，应充分考虑病毒基因多态性的影响。