肝癌及相关组织中NET-1基因与蛋白的表达

背景与目的：NET-1是最近发现的肿瘤相关基因，它在肝癌中的表达目前尚未见报道。本研究在胚胎肝、成人肝、肝癌及相应的癌旁组织中筛检和比较NET-1基因和蛋白表达，以探讨NET-1基因在肝癌表达的特征。方法：用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测3例胚胎肝、4例成人肝、4例验证肝癌组织和28例肝癌与相应癌旁组织中NET-1mRNA的表达，由四星图像分析系统软件检测NET-1基因mRNA的光密度。用基因生物工程方法制备NET-1多克隆抗体．并用激光共聚焦显微镜观察免疫荧光细胞化学检测培养的人肝癌细胞系SMMC-7721中NET-1抗体的表达，免疫组化法检测28例肝癌与癌旁组织中NET-1蛋白的表达。结果：（1）正常成人和胎儿肝组织中NET-1基因mRNA不表达，4例验证肝癌组织中NET-1基因mRNA均呈阳性表达；肝癌与癌旁组织中NET-1基因mRNA高表达，阳性率均为85．71％（24／28）。肝癌组织中NET-1 mRNA的平均光密度显著高于癌旁组织（0．64与0．47，P〈0．05）。（2）经激光共聚焦显微镜观察SMMC-7721细胞中NET-1抗体的表达定位于胞浆。（3）免疫组化检测NET-1多克隆抗体在同组肝癌和癌旁组织中NET-1蛋白检出率分别为96．43％（27／28）和71．43％（20／28），两者差异具有显著性意义（P〈0．05）。（4）RT-PCR方法和免疫组化方法检测肝癌和癌旁组织中NET-1基因mRNA表达与蛋白表达两者之间阳性率无显著性差异，并呈显著性正相关（癌中r=0．48，癌旁r=0．40，均P〈0．05）。结论：NET-1基因表达可能是肝癌发生的早期分子事件，该基因在肝癌诊断中可能有一定的参考价值。