脂多糖刺激巨噬细胞分泌含miR-155-5p的外泌体促进肝星状细胞的活化及迁移

脂多糖刺激巨噬细胞分泌含miR-155-5p的外泌体促进肝星状细胞的活化及迁移

目的 探索脂多糖(LPS)刺激下的巨噬细胞来源的外泌体对肝星状细胞的激活及迁移能力的影响及分子机制.方法 以100 ng/mL丙二醇甲醚醋酸(PMA)处理人THP-1巨噬细胞24 h,诱导其分化为巨噬细胞,给予脂多糖刺激后收集巨噬细胞的培养上清,运用超速离心法提取外泌体并加以鉴定.荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外泌体中miR-155-5p的表达.采用Transwell共培养体系观察巨噬细胞分泌的外泌体对肝星状细胞LX2增殖、氧化应激、迁移和Ⅰ型胶原等纤维化标志物表达的影响.同时,LX2转染miR-155-5p-mimics及miR-155-5p-inhibitors分别过表达和干扰miR...

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Veröffentlicht in:南方医科大学学报 2023, Vol.43 (6), p.994-1001
Hauptverfasser: 林嘉宜, 娄安妮, 李旭
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的 探索脂多糖(LPS)刺激下的巨噬细胞来源的外泌体对肝星状细胞的激活及迁移能力的影响及分子机制.方法 以100 ng/mL丙二醇甲醚醋酸(PMA)处理人THP-1巨噬细胞24 h,诱导其分化为巨噬细胞,给予脂多糖刺激后收集巨噬细胞的培养上清,运用超速离心法提取外泌体并加以鉴定.荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外泌体中miR-155-5p的表达.采用Transwell共培养体系观察巨噬细胞分泌的外泌体对肝星状细胞LX2增殖、氧化应激、迁移和Ⅰ型胶原等纤维化标志物表达的影响.同时,LX2转染miR-155-5p-mimics及miR-155-5p-inhibitors分别过表达和干扰miR-155-5p,从正反两方面去验证miR-155-5p对LX2功能的影响.Western blot检测SOCS1以及其下游信号通路蛋白的表达.结果 与对照相比,经脂多糖刺激后巨噬细胞的外泌体处理的LX2细胞增殖迁移能力增强,氧化应激水平和Ⅰ型胶原等纤维化标志物的表达明显增高(P
ISSN:1673-4254
DOI:10.12122/j.issn.1673-4254.2023.06.15