TNF-α通过唾液酸化促进小鼠破骨细胞分化

目的 探究TNF-α促进破骨细胞分化的作用机制.方法 利用4月龄野生型小鼠与同龄TNF-α转基因鼠进行体内研究,分别收集双侧膝骨关节样本后,进行CT扫描分析骨量差异,TRAP染色及免疫荧光染色分析破骨细胞分化程度及唾液酸表达水平.体外培养破骨细胞前体细胞系RAW264.7分为3组:RAW对照组(不含药物的分化培养基处理);RAW实验组(含有TNF-α的分化培养基处理);RAW药物组(含有TNF-α和唾液酸酶的分化培养基处理).体外培养3 d后进行qPCR检测,TRAP染色,唾液酸免疫荧光共定位染色分析.同时,分离培养野生型小鼠(BM对照组)和TNF-α转基因鼠[BM实验组(不含药物的分化培养基处理),BM药物组(含有唾液酸酶的分化培养基处理)]原代骨髓源巨噬细胞,3 d后进行TRAP染色及唾液酸染色.结果 TRAP染色显示,TNF-α转基因鼠膝关节软骨下骨中破骨细胞数量较野生型小鼠显著增多(P