大鼠帕金森病模型中α-突触核蛋白对干扰素调节因子1的调控及其机制

大鼠帕金森病模型中α-突触核蛋白对干扰素调节因子1的调控及其机制

目的 研究α-突触核蛋白(α-Syn)对干扰素调节因子1(IRF-1)表达的影响及其分子机制.方法 选用α-Syn过表达的SH-SY5Y细胞以及3月龄、6月龄A53Tα-Syn转基因小鼠,应用Real-time PCR和Western blot技术检测IRF-1表达的变化,免疫荧光染色和核浆蛋白分离技术观察IRF-1亚细胞定位情况.不同浓度的蛋白酶体抑制剂MG132(0、0.01、0.05、0.1、0.2、0.5、1、2μmol/L)以及溶酶体抑制剂氯喹(0、5、10、30、50、100、150、200μmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h,检测细胞存活率.选用不引起细胞损伤的最大浓度0...

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Veröffentlicht in:南方医科大学学报 2021, Vol.41 (11), p.1641-1648
Hauptverfasser: 牟斐斐, 陈曦, 杜希恂, 焦倩, 毕明霞, 姜宏
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的 研究α-突触核蛋白(α-Syn)对干扰素调节因子1(IRF-1)表达的影响及其分子机制.方法 选用α-Syn过表达的SH-SY5Y细胞以及3月龄、6月龄A53Tα-Syn转基因小鼠,应用Real-time PCR和Western blot技术检测IRF-1表达的变化,免疫荧光染色和核浆蛋白分离技术观察IRF-1亚细胞定位情况.不同浓度的蛋白酶体抑制剂MG132(0、0.01、0.05、0.1、0.2、0.5、1、2μmol/L)以及溶酶体抑制剂氯喹(0、5、10、30、50、100、150、200μmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h,检测细胞存活率.选用不引起细胞损伤的最大浓度0.2μmol/L MG132和30μmol/L氯喹处理SH-SY5Y细胞24 h,检测IRF-1蛋白水平的变化.观察α-Syn对MDM2蛋白水平的影响,并进一步通过泛素化实验检测IRF-1泛素化水平的变化.结果 α-Syn过表达不影响IRF-1 mRNA水平,却可显著上调其蛋白水平(P
ISSN:1673-4254
DOI:10.12122/j.issn.1673-4254.2021.11.07