鸡胚胎原始生殖细胞的培养和传代

Q95; 本文旨在探索鸡胚胎原始生殖细胞(Primordial germ cells, PGCs)培养、传代以及各种因素对PGCs培养的影响.实验结果表明,在添加10%的胎牛血清、2%的鸡血清、2 mmol/L L-谷氨酰胺、1 mmol/L丙酮酸钠、5.5×10-5 mol/L β-巯基乙醇、10 μl/ml 非必需氨基酸、以及5 ng/ml人干细胞生长因子(Human stem cell factor,hSCF)、10 U/ml鼠白血病抑制因子(Mouse leukemia inhibitory factor,mLIF)、10 ng/ml碱性成纤维生长因子(Fibroblast growth factor-basic,bFGF)、0.04 ng/ml人白细胞介素-11(Human interleukin 11,hIL-11), 10 ng/ml胰岛素样生长因子(Human insulin-like growth factor,hIGF)的高糖DMEM培养体系中,以多次离散法进行传代获得5-6代鸡胚胎PGCs,有效地维持了PGCs的未分化状态和正常二倍体核型,同时能够定向地诱导分化为神经细胞,具有作为多能性胚胎干细胞的特征