BLyS受体TACI、BCMA与人IgG1 Fc融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达与鉴定

从人肝脏和肾脏cDNA文库中扩增了人IgG1 Fc与B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的受体TACI及BCMA的胞外编码区,构建了TACI-Fc及BCMA-Fc融合表达质粒pSec1-Fc-TACI与pSec1-Fc-BCMA,并使用电穿孔法转染COS-7细胞,从1L无血清培养上清中可纯化得到分泌表达的TACI-Fc与BCMA-Fc融合蛋白约2 mg.为获得TACI Fc与BCMA-Fc的稳定来源,构建了TACI-Fc与BCMA-Fc的CHO稳定表达细胞株.免疫沉淀和ELISA结果显示,TACI-Fc及BCMA-Fc能特异性地结合其配体BLyS而不与BLyS同家族的TNF结合.TACI-Fc及BC...

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Veröffentlicht in:	动物学报 2004, Vol.50 (3), p.401-407
Hauptverfasser:	田瑞阳, 黄玉辉, 陈悦, 韩威, 俞缨, 刘惠, 翁忠辉, 杨胜利, 龚毅
Format:	Artikel
Sprache:	chi
Online-Zugang:	Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:	从人肝脏和肾脏cDNA文库中扩增了人IgG1 Fc与B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的受体TACI及BCMA的胞外编码区,构建了TACI-Fc及BCMA-Fc融合表达质粒pSec1-Fc-TACI与pSec1-Fc-BCMA,并使用电穿孔法转染COS-7细胞,从1L无血清培养上清中可纯化得到分泌表达的TACI-Fc与BCMA-Fc融合蛋白约2 mg.为获得TACI Fc与BCMA-Fc的稳定来源,构建了TACI-Fc与BCMA-Fc的CHO稳定表达细胞株.免疫沉淀和ELISA结果显示,TACI-Fc及BCMA-Fc能特异性地结合其配体BLyS而不与BLyS同家族的TNF结合.TACI-Fc及BCMA-Fc可阻断BLyS对体外培养的小鼠B淋巴细胞的促增殖作用[动物学报50(3):401-407,2004].
ISSN:	0001-7302
DOI:	10.3969/j.issn.1674-5507.2004.03.014