Puesta a punto de un método de cultivo Aire-Líquido para el estudio de la Discinesia Ciliar Primaria

[ES] RESUMEN: -INTRODUCCIÓN: La Discinesia Ciliar Primaria (DCP) es una enfermedad rara respiratoria con una prevalencia de 1/20000. Es una condición hereditaria y permanente causada por defectos congénitos en la ultraestructura de los cilios. Se manifiesta causando un funcionamiento deficiente del sistema de aclaramiento mucociliar, generando congestión nasal, tos, otitis o en casos más graves problemas pulmonares como las bronquiectasias. Se trata de una enfermedad con un diagnóstico tardío e infradiagnosticada por lo que actualmente se buscan nuevas técnicas para el estudio de la enfermedad. Es por ello por lo que un cultivo en interfaz Aire-Líquido (ALI) permite generar condiciones más similares a las fisiológicas, utilizándose como modelo para el estudio de la DCP. Sin embargo, las células están sometidas a un equilibrio sustancias oxidantes-sustancias antioxidantes, que puede verse alterado por los cambios en las condiciones del cultivo ALI, generando una situación de estrés oxidativo. -MÉTODOS: Establecimiento de un modelo celular para la investigación de la DCP mediante la técnica de cultivo ALI de células epiteliales nasales obtenidas del cornete nasal medio de un individuo sano. Este cultivo permite la diferenciación celular logrando así el desarrollo de un epitelio pseudoestratificado. En segundo lugar, se llevó a cabo, mediante RT-qPCR, el análisis de la expresión de diversos genes del sistema antioxidante en las diferentes etapas del cultivo ALI. -RESULTADOS: El cultivo se alcanzó con éxito, caracterizado por la presencia de células ciliadas generadoras de movimiento. Asimismo, las células en general en el cultivo, están sometidas a un mayor estrés oxidativo cuando se encuentran totalmente sumergidas, es decir, en la etapa de crecimiento y proliferación. -CONCLUSIÓN: Los resultados obtenidos en este trabajo indican que ha sido posible, la puesta a punto en nuestro laboratorio, del cultivo ALI caracterizado por el desarrollo de células epiteliales nasales, células productoras de mucosidades y células multiciliadas características del epitelio nasal humano. En este contexto, el cultivo ALI destaca por su beneficioso uso en el estudio de enfermedades respiratorias, favoreciendo la diferenciación celular, no adquirida en los cultivos en monocapa. [EN] SUMMARY: -INTRODUCTION: Primary Ciliary Dyskinesia (DCP) is a rare respiratory disease with a prevalence of 1/20000. It is a hereditary and permanent condition caused by congenital defects in the ult