Somatic embryogenesis from immature cotyledons of apomictic and non-apomictic seeds in walnut (Juglans regia L.)

Bazı ceviz (Juglans regia 1.) genotiplerinde apomiktik ve açıkta tozlanmış tohumların olgunlaşmamış kotiledonlarından somatik embriyogenesis araştırılmıştır. Apomiktik tohumları elde etmek için dişi çiçekler keselenmiş ve/veya 'Golden Delicious' (Malus x domestica Borkh.) elma çiçek tozlan ile tuzlanmıştır. Somatik embriyogenesisiçin en iyi kotiledon aşaması, on ceviz genotipinin açıkta tozlanmış tohumlarında belirlenmiştir. Olgunlaşmamış kotiledonlar tam çiçeklenmeden 8, 9, 10, 11 ve 12 hafta sonra kültüre alınmıştır. Bu denemenin sonucuna göre apomiktik orijinli olduğu düşünülen tohumların kotiledonları tam çiçeklenmeden 8 hafta sonra kültüre alınmıştır. Başlangıç kültürlerinde 1 mg f1 6-benzilaminopürin (BAP), 2 mg I'1 kinetin, 0.01 mg I"1 indol-3-bütirik asit (IBA) ve 250 mg I"1 L-glutamin ile desteklenmiş Driver ve Kuniyuki ceviz (DKW) ortamı kullanılmıştır. Eksplantlar alt kültürlerde büyümeyi düzenleyici maddeler ve L-glutamin bulunmayan DKW ortamına transfer edilmiştir. Dördüncü alt kültürün sonunda apomiktik ve apomiktik olmayan tohumlardan orijinini almış embriyogenik kotiledonlann oranı %3.6'dan %25'e kadar değişmiştir ve kotiledon başına embriyo sayısı 1'den 9.7'ye değişmiştir. Somatik embriyogenesis ile Tokat-1' ceviz genotipinin apomiktik tohumlarının olgunlaşmamış kotiledonlarından orijinini almış tekrar eden bir embriyogenik embriyo hattı sağlanmıştır. Somatic embryogenesis from immature cotyledons of apomictic and open-pollinated seeds in some walnut (Juglans regia L.) genotypes was investigated. To obtain apomictic seeds, female flowers were bagged and/or pollinated with pollen of the apple cv. 'Golden Delicious' (Malus x domestica Borkh.). The best cotyledon stage for somatic embryogenesis was determined in open-pollinated seeds of 10 walnut genotypes. Immature cotyledons were cultured 8, 9, 10, 11 and 12 weeks after anthesis. As a result of this experiment, cotyledons of seeds thought to be of apomictic origin were cultured 8 weeks after anthesis. Driver and Kuniyuki walnut (DKW) medium supplemented with 1 mg I"1 6-benzylaminopurine (BAP), 2 mg I"1 kinetin, 0.01 mg I"1 indole-3-butyric acid (IBA) and 250 mg I'1 L-glutamine was used in initial cultures. Explants were transferred to DKW medium without growth regulators and L-glutamine in subcultures. The percentage of embryogenic cotyledons that originated from apomictic and non-apomictic seeds ranged from 3.6% to 25% and the number of embryos per cotyledon ranged from 1 to 9.7 at the end