Sığır rumen doku arginazı ve subünitelerinin molekül ağırlığı

Sığır rumen doku arginazı kısmi olarak sataştırılmış, özellikleri araştırılmış ve diğer doku arginazlarınınki ile karşılaştırılmıştır. Saflaştırılmış enzimin spesifik aktivitesi rumen homojenatından yaklaşık 150 kez fazla bulunmuştur.Nativ enzimin molekül ağırlığı sefadeks G-150 jel filtrasyonla 122 500 ± 2500, Subünitelerinin molekül ağırlığı ise SDS-PAGE ve sefadeks G-100 jel filtrasyonla 44 000 ± 1000 ve 34 500 ± 500 olarak saptanmıştır. Nativ enzim, iki farklı molekül ağırlığa sahip subünitelerin birleşmesi ile meydana gelen bir trimerdir. Saflaştırılmış enzim, aktivitesini buzdolabı, oda sıcaklığı ve derin dondurucuda giderek kaybettiğinden dayanıksızdır. Enzim -30 °C 'de (derin dondurucuda) 9 günde aktivitesinin % 50'sini kaybetmektedir.DEAE-sephacel kromatografi ile sığır rumen doku arginazının tek bir anyonik formunun varlığı gösterilmiştir. Bir başka deyişle sığır rumen doku arginazı tek bir izoenzim içermektedir. Sığır rumen dokusundan izole edilen arginazın, diğer doku arginaz izoenzimleri ile karşılaştırıldığında A2 veya A4 formu olabileceği düşünülmüştür. The arginase was partially purified from cattle rumen tissue and its properties were investigated and thereafter compared with those of other tissue arginases. The specific activity of the purified enzyme was found about 150 times greater than that of the crude rumen homogenate. The molecular weight of native arginase, estimated by gel filtration on a Sephadex G-150 column, was 122 500 ± 2500 and those of subunits of the enzyme, estimated by SDS-PAGE and gel filtration on a Sephadex G-100 column, were 44 000 ± 1000 and 34 500 ± 500. This indicates that the native enzyme is a trimer composed of subunits with two different molecular weights. The enzyme was unstable because it gradually lost its activity in a freezer, at +4 °C and room temperature. The enzyme lost 50% of total activity in 9 days at -30 °C (in the freezer). The presence of a single anionic form of arginase in cattle rumen tissue was demonstrated by DEAE-sephacel chromatography. Cattle rumen tissue arginase contains only one isoenzyme. Arginase isolated from cattle rumen tissue may be arginase A4 or A2 form when it is compared with those of other tissue arginase isoenzymes.