Candida türlerinin biyofilm oluşturan ve planktonik formlarının antifungal ajanlara karşı in vitro duyarlılıklarının araştırılmasında iki farklı yöntemin karşılaştırılması

Antifungal ajanların Candida türlerine karşı, minimum inhibitör konsantrasyonu (MİK)'nu belirlemek için kullanılan mikrodilüsyon yöntemi, bu mikroorganizmaların hem biyofilm hem de planktonik formları için halen laboratuvarlarda kullanılan tek yöntemdir. Bununla birlikte birçok araştırmada, aynı mikroorganizmanın biyofilm ve planktonik formlarının in vitro duyarlılıklarında farklılık olduğu bildirilmiştir. Bu çalışmada, Candida suşlarının biyofilm oluşturan ve planktonik formlarının antifungal ilaçlara karşı duyarlılıklarının saptanması, elde edilen verilerin karşılaştırılması ve biyofilmdeki mayaların duyarlılığının saptanmasında kullanılan iki farklı yöntemin değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Çalışmada, Candida albicans ATCC 10231, Candida krusei ATCC 6258 ve Candida parapsilosis ATCC 90028 standart suşları ile birer adet olmak üzere C.albicans, C.parapsilosis ve Candida tropicalis klinik izolatları kullanılmıştır. Planktonik formların duyarlılıklarının saptanmasında mikrodilüsyon yöntemi, CLSI M27-A3 standartlarına göre uygulanmış ve flukonazol, itrakonazol, flusitozin, amfoterisin B ve nistatin için MİK değerleri belirlenmiştir. Çalışmaya alınan suşların biyofilm formlarının duyarlılıkları ise aynı antifungal ilaçlara karşı Calgary biyofilm yöntemi (CBY) ve BioTimer yöntemi (BTY) ile araştırılmış ve minimum biyofilm eradikasyon konsant- rasyonu (MBEK) ve minimum biyofilm inhibisyon konsantrasyonu (MBİK) değerleri saptanmıştır. Çalışmamızda, MİK ile CBY-MBEK değerleri arasında, CBY-MBEK ile BTY-MBEK değerleri arasında ve CBYMBEK ile BTY-MBİK değerleri arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlı bulunmuştur (p< 0.05). Genel olarak, CBY-MBEK değerleri MİK değerlerinden daha yüksektir. Ancak biyofilmdeki mikroorganizmaların asıl sayısı tespit edilemediğinden, MBEK değerleri her zaman doğru sonuç vermemektedir. Bununla birlikte çalışmamızda elde edilen BTY-MBİK değerleri de, genellikle MBEK değerlerinden daha düşük ve MİK değerlerinden daha yüksektir. Sonuçlar değerlendirildiğinde yalnızca flusitozin (p= 0.002) ve itrakonazolün (p= 0.025) MBEK değerleri açısından yöntemler arasında istatistiksel olarak anlamlı fark tespit edilmiştir. Yine flusitozin (p= 0.001) ve itrakonazol (p= 0.001) için, CBY-MBEK ve BTY-MBİK değerleri arasında anlamlı fark tespit edilirken, diğer antifungal ilaçlarda, bu değerler arasındaki fark da istatistiksel olarak anlamlı değildir (p> 0.05). Bu bulgular, biyofilm oluşturan Candida suşlarının da in vitro duyarlılıklarının sapt