Identificación de genes implicados en la adquisición del fenotipo metastásico en modelos experimentales de cáncer de mama

Consultable des del TDX Títol obtingut de la portada digitalitzada El cáncer de mama es una de las enfermedades más frecuentes entre las mujeres de los países desarrollados. La metástasis de los tumores es la principal causa de la muerte de un paciente con cáncer. Una de las maneras de abordar el estudio molecular y celular del proceso de desarrollo de las metástasis es la identificación de genes asociados al fenotipo metastásico. El método RAP-PCR (RNA arbitrarily primed PCR) consiste en dos reacciones consecutivas: una transcripción inversa del mRNA utilizando un cebador aleatorio y una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en que se emplea el mismo cebador más otro cualquiera. Con este método se pueden comparar simultáneamente fragmentos de DNA obtenidos aleatoriamente a partir del RNA de muchas variantes celulares con diferente capacidad metastásica. Si estos fragmentos, usados como sondas en análisis Northern, hibridan con RNA y se observan en cantidades relativas muy diferentes entre las distintas variantes celulares, se asume que los genes cuya expresión representan se expresan de manera muy diferente y pueden ser, por tanto, candidatos a influir en la aparición del fenotipo metastásico. En el presente trabajo, se ha empleado este método para el estudio de dos modelos experimentales de carcinoma de mama: uno de ratón (MXT) y otro humano (MDA MB-435). En ambos modelos existen variantes celulares con características invasivas y metastásicas bien diferenciadas. Los resultados obtenidos muestran que el método RAP-PCR permite detectar RNAs anónimos correspondientes a genes que se expresan diferencialmente en variantes de distinta capacidad metastásica, pero de acervo genético común. A partir de algunos de los fragmentos observados con expresión diferencial en los modelos tumorales MXT y MDA MB-435 (más de 50), se han identificado diversos genes. Los de mayor expresión en las variantes metastásicas fueron los correspondientes a enolasa, ESDN (endothelial and smooth muscle cell-derived neuropilin-like protein), S-adenosilhomocisteína hidrolasa, CHL1 (close homolog to L1CAM), Slmap (sarcolemmal-associated protein), eEF-1α (factor de elongación 1α), Nono (non-POU domain-containing octamer-binding protein), moesina, eplin (epithelial protein lost in neoplasm), ADAMTS1, y a la proteína hipotética FLJ10830. Los de menor expresión en las variantes metastásicas fueron los correspondientes a la cadena β de HLA-DP, la enzima E2 (variante 1) (ubiquitin-conjugati