Unraveling CK2 inhibition and temozolomide contribution to therapy response in preclinical GL261 glioblastoma: immune system implications and magnetic resonance based nosological imaging

El glioblastoma (GB) es el tumor primario más común en adultos. Debido a su mal prognóstico, es urgente encontrar mejoras en su tratamiento. El objetivo de esta tesis es estudiar el efecto de inhibidores de CK2 y del agente alquilante Temozolamida (TMZ) a la respuesta a terapia en el modelo de GB preclínico GL261 utilizando tanto métodos in vitro (línea celular GL261) como in vivo (ratones GL261 con tumores). La enzima CK2 es un tetrámero compuesto por dos subunidades catalíticas (α/ α') y dos subunidades reguladoras (β). En esta tesis, se describe el contenido diferencial de la subunidad CK2 α' en células GL261 con alto y bajo estado de proliferación. Esta diferencia podría afectar potencialmente a la susceptibilidad de estas células al tratamiento con inhibidores de CK2, dependiendo de su estado de proliferación. Además, el efecto del inhibidor dual de CK2 y Pim-1, TDB ha sido evaluado a nivel celular y sistémico utilizando el modelo GL261. Mientras el TDB ejerce efectos muy potentes en células tumorales in vitro, no hemos sido capaces de detectar ningún efecto inhibitorio en CK2 en la masa tumoral de animales GL261 tras la administración del fármaco. Estos resultados apuntan a que sería necesaria la reformulación del fármaco para mejorar su biodisponibilidad y sus efectos. Resultados preliminares de nuestro grupo mostraron una mayor supervivencia en ratones con tumor tratados con una terapia metrónomica inmunogénica (1 dosis cada 6 días) con la combinación de TMZ y el inhibidor de CK2 CX-4945, a pesar de que con otros esquemas de administración no se observara ninguna mejora. En este sentido, se ha descrito que ciertos fármacos inmunogénicos son capaces de desencadenar en células tumorales la exposición y liberación de señales de peligro que provocan la activación de una potente respuesta antitumoral por parte del sistema inmune del huésped. En esta tesis, se han realizado experimentos in vitro para determinar la presencia de señales de peligro en células tratadas con ambos tratamientos, ya sea por separado o en combinación. Los resultados muestran que las células tratadas con TMZ y con la combinación CX-4945+TMZ exponen calreticulina, una señal de daño temprana en la cascada inmunogénica. Además, las células tratadas con CX-4945 y CX-4945+TMZ liberan ATP, otra señal de daño que contribuye a la activación del sistema inmune. Por último, la evolución de ratones con tumores GL261 tratados con TMZ con un esquema de administración inmunogénico ha sido evalu